Ab Donnerstag, dem 05. März 2009, nehmen die beiden Autobahnkommissare Semir Gerkhan (Erdogan Atalay) und Ben Jäger (Tom Beck) wieder die Ermittlungen auf. In sechs spannenden Fällen riskieren sie erneut Kopf und Kragen. Nachdem sich beide anfangs gar nicht riechen konnten, sind aus den beiden mittlerweile richtig gute Freunde geworden, die sich während den Ermittlungen auch gerne einmal einen lockeren Spruch um die Ohren hauen. Doch bei allem Spaß verlieren die Kommissare ihr Ziel nie aus den Augen: Die Verbrecher in ihrem Revier dingfest machen.
In ihrem ersten Fall "Im Aus" geraten sie das erste Mal mit ihrer neuen Chefin Kim Krüger (Katja Woywood) aneinander. Aufgrund von scheinbar untrüglichen Beweisen, glaubt sie nämlich, dass Susanne König, die Sekretärin der Autobahnpolizei, im Alkoholrausch einen schweren Verkehrsunfall verursacht hat. Doch Semir und Ben wollen mit aller Macht das Gegenteil beweisen.
Doch auf die Kommissare warten weitere Probleme: In ihren weiteren Ermittlungen der Staffel wird Bens Schwester kurz nach ihrer Hochzeit entführt. Und dann wird auch noch Ben vom Dienst suspendiert, weil er auf eigene Faust einen Mord aufdecken will ...
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